طراحی روشی نوین بر پایه پپتید های تراوا کننده غشا جهت افزایش بازدهی انتقال dna خارجی به باکتری اشرشیاکولی

Authors

محمد هیئت

mohammad heiat applied biotechnology research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iranمرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج) – تهران - ایران محمد افتخاری شیر کوهی

mohammad eftekhari applied biotechnology research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iranمرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج) – تهران - ایران حسین آقاملایی

hossein aghamollaei applied biotechnology research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iranمرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج) – تهران - ایران مهرداد موسی زاده مقدم

mehrdad moosazadeh moghaddam applied biotechnology research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iranمرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج) – تهران - ایران

abstract

سابقه و هدف: انتقال dna خارجی با بازدهی بالا به داخل باکتری از مهمترین مراحل در زیست فناوری میکروبی می باشد. برای این منظور چند روش مرسوم است که در بین آن ها روش کلسیم کلراید سرد از جمله مهمترین و ارزان ترین روش ها جهت انتقال dna به درون سلول های باکتریایی گرم منفی مانند escherichia coli می باشد. به طور معمول بازدهی انتقال dna در این روش107- 105 کلونی برای یک میکروگرم از dna خارجی می باشد. با توجه به اهمیت فرایند انتقال dna، تلاش های بسیاری به منظور بهینه سازی روش های مرسوم همچون کلرید کلسیم صورت گرفته است. در این مطالعه نشان دادیم با استفاده از یک پپتید کاتیونیک تراوا کننده غشاء (cm11) و بر پایه روش استاندارد کلرید کلسیم، می توان dna خارجی را با بازدهی بالاتری به درون باکتری e.coli انتقال داد. مواد و روش ها: سلول های باکتریایی توسط غلظت های متفاوت پپتید ( 5/0، 1 ،2 ،3 و 6 میکرو گرم در میلی لیتر) و به دو روش متفاوت و بر پایه مستعدسازی توسط کلرید کلسیم، تیمار شدند. سپس پلاسمیدهای pet-28a(+), pgex4t-1 وpuc19 به عنوان مدل و به صورت جداگانه به درون باکتری مستعد شده منتقل گردیدند. یافته ها: نتایج نشان داد که بالاترین بازدهی انتقال پلاسمید برای باکتری های مستعد شده در حضور غلظت 1 میکروگرم در میلی لیتر پپتید بدست می آید. در این غلظت افزایش انتقال برای پلاسمیدهای pet-28a(+), pgex4t-1 وpuc19 به ترتیب 4/4، 7/4 و 4 برابر نمونه کنترل بود.  نتیجه گیری: این مطالعه نشان داد که پپتید cm11 به عنوان یک پپتید تراوا کننده غشاء سلول می تواند باعث افزایش کارامدی انتقال dna به درون باکتری e. coli با استفاده از مستعدسازی به روش شیمیایی کلرید کلسیم گردد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

طراحی روشی نوین بر پایه پپتید های تراوا کننده غشا جهت افزایش بازدهی انتقال DNA خارجی به باکتری اشرشیاکولی

سابقه و هدف: انتقال DNA خارجی با بازدهی بالا به داخل باکتری از مهمترین مراحل در زیست فناوری میکروبی می‌باشد. برای این منظور چند روش مرسوم است که در بین آن‌ها روش کلسیم کلراید سرد از جمله مهمترین و ارزان‌ترین روش‌ها جهت انتقال DNA به درون سلول‌های باکتریایی گرم منفی مانند Escherichia coli می‌باشد. به طور معمول بازدهی انتقال DNA در این روش107- 105 کلونی برای یک میکروگرم از DNA خارجی می‌باشد. با...

full text

افزایش بازدهی روش طبیعی استفاده از محیط اسپیزیزن برای انتقال پلاسمید به درون باکتری باسیلوس سوبتیلیس با استفاده از یک پپتید کاتیونیک تراوا کننده غشا باکتریایی

مقدمه: تعدادی از گونه‌های باکتریایی قادرند تا مولکول DNA را از محیط اطرافشان در‌یافت نمایند؛ میزان این دریافت به شرایطی مانند بزرگی پلاسمید و نوع میزبان بستگی دارد. در مورد باکتری باسیلوس سوبتیلیس نیز این امکان البته با میزان انتقال بسیار پایینی وجود دارد. در حال حاضر روش مرسوم برای انتقال پلاسمید خارجی به درون باکتری باسیلوس سوبتیلیس استفاده از روش طبیعی در یک محیط کشت حداقل (اسپیزیزن) است. در...

full text

افزایش بازدهی روش طبیعی استفاده از محیط اسپیزیزن برای انتقال پلاسمید به درون باکتری باسیلوس سوبتیلیس با استفاده از یک پپتید کاتیونیک تراوا کننده غشا باکتریایی

مقدمه: تعدادی از گونه های باکتریایی قادرند تا مولکول dna را از محیط اطرافشان در یافت نمایند؛ میزان این دریافت به شرایطی مانند بزرگی پلاسمید و نوع میزبان بستگی دارد. در مورد باکتری باسیلوس سوبتیلیس نیز این امکان البته با میزان انتقال بسیار پایینی وجود دارد. در حال حاضر روش مرسوم برای انتقال پلاسمید خارجی به درون باکتری باسیلوس سوبتیلیس استفاده از روش طبیعی در یک محیط کشت حداقل ( اسپیزیزن ) است. ...

full text

روشی نوین جهت افزایش مقاومت پیش بین کننده اسمیت در مقابل خطای مدل

 در این مقاله روشی جدید برای افزایش مقاومت روش جبرانگر تاخیر زمانی اسمیت در مقابل خطا ی مدل ارائه شده است. این روش بر اساس مفهوم بهره برتر می باشد. در این روش با دانستن حداکثر خطا و استفاده از مفهوم بهره برتر، تابع حلقه باز سیستم کنترل با اضافه کردن تابع مناسبی طوری تنظیم میکنیم که مطمئن باشیم تمامی صفرهای معادله حلقه باز سیستم کنترل که ناشی از پارامتر  تاخیر زمان می باشند، در چپ قرار می گیرند....

full text

طراحی مدل جهت انتقال فناوری نوین در نظام آموزش عالی

تکنولوژی آموزشی روش سیستماتیک طراحی، اجرا و ارزشیابی کل فرآیند یادگیری که برمبنای اهداف ویژه جهت ایجاد آموزش مؤثرتر در جهت دانش آفرینی تنظیم می شود. و بکارگیری ازاین تکنولوژی در مکانی بجز مکان اولیه ،انتقال تکنولوژی است. پژوهش با هدف طراحی مدل جهت انتقال تکنولوژی آموزشی در دانشگاههای آزاد مازندران انجام شد. روش تحقیقدر بخش کیفی از نوع درهم تنیده و در بخش کمی توصیفی از نوع پیمایشی است. جامعه 170...

full text

روشی نوین جهت افزایش مقاومت پیش بین کننده اسمیت در مقابل خطای مدل

در این مقاله روشی جدید برای افزایش مقاومت روش جبرانگر تاخیر زمانی اسمیت در مقابل خطا ی مدل ارائه شده است. این روش بر اساس مفهوم بهره برتر می باشد. در این روش با دانستن حداکثر خطا و استفاده از مفهوم بهره برتر، تابع حلقه باز سیستم کنترل با اضافه کردن تابع مناسبی طوری تنظیم میکنیم که مطمئن باشیم تمامی صفرهای معادله حلقه باز سیستم کنترل که ناشی از پارامتر  تاخیر زمان می باشند، در چپ قرار می گیرند. ...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولی

جلد ۴، شماره ۱۴، صفحات ۹۹-۱۰۸

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023